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这样的外泌体WB条带,你喜欢吗?
人阅读 发布时间:2024-04-15 11:33
正在做细胞外囊泡,特别是外泌体的同志们是否都等一张完美的WB条带?没有这张美图,文章该如何发表?作为细胞外囊泡/外泌体表征必不可少的一步,Western Blot结果几乎是必须的。但常见看家蛋白actin、tubulin及GAPDH在细胞外囊泡/外泌体中表达很低,通常难以检测到;即使是有条带出来,通常信号也非常弱,作为内参实在是太勉强!
然而……下图这样的外泌体WB条带,特别是内参,是你梦寐以求的吗?天天在实验室熬夜熬到头秃,不就是为了这一张美图吗?
图源:doi.org/10.1186/s13287-024-03669-5
同学们一定好奇,这样一张美图到底是怎么做出来的,是否我也可以做出这样一张完美的WB结果。这张图摘自期刊《Stem Cell Research & Therapy》2024年发表的文章“Oxidized SOD1 accelerates cellular senescence in neural stem cells”。样品是来源于衰老的神经干细胞(NSC)外囊泡,WB显示了错误折叠和氧化的 hSOD1表达水平。其内参使用的是Bio-Rad Stain-Free免染技术在凝胶上获得的总蛋白条带。与常规的细胞外囊泡的WB内参结果相比,Stain-Free免染总蛋白条带清晰,明显,非常清楚的显示了要比较的两个泳道的蛋白上样量。使用Stain-Free免染总蛋白作为内参,就不用再费力的尝试其他看家蛋白,更不用因为缺内参结果而担心WB数据不准,也不用担心文章因缺WB内参数据而被拒!